内蒙古 氨基嘧啶

近年来,虽有不少分子靶向抗肿瘤药物进入临床应用,但由于肿瘤的复杂性、遗传的多样性,单一靶向药物并不足以治愈肿瘤。传统的DNA损伤药物虽能延长肿瘤患者的生存期,但因其选择性差、可引起多种严重的毒副作用而限制了其在临床上的应用。因此,开发细胞周期相关药物及其与DNA损伤药物联合用药的策略已成为抗肿瘤药物研发的热点之一。本论文根据文献报道的细胞周期检查点激酶1(Chk1)抑制剂的结构特征及其与Chk1蛋白的结合模式,应用生物电子等排原理,设计合成了 28个噻吩骈吡啶酮类衍生物。体外Chk1抑制活性结果表明:大部分化合物显示出中等到强的Chk1抑制活性。其中,10个化合物的IC50值小于10 nM,并讨论了其构效关系。同时,部分化合物对相关激酶具有较好的选择性。3个代表性化合物1-65,1-68及1-71单独用药未表现出明显的细胞毒性,但均能显著增强DNA损伤药物美法仑对RPMI-8226细胞株的增殖抑制活性。内蒙古氨基嘧啶在新一轮的结构改造过程中,结合文献报道的另一个吲哚-喹啉酮类化合物2-1,采用骨架迁越的原理,初步设计合成了 4个3-吲哚吡啶酮类化合物,并进行了体外Chk1抑制活性测试。遗憾的是这4个化合物对Chk1激酶均没有明显的抑制作用。在对化合物2-22进行其它激酶靶点(IKKβ、CDK2/cyclinA、Aurora A及PKC)的活性筛选过程中发现,其具有一定的Aurora A抑制作用(IC50= 1.23μM)。为寻找全新母核结构的Chk1抑制剂,我们采用计算机辅助药物设计技术构建了基于晶体结构的Chk1抑制剂的虚拟筛选模型。在利用该模型对Chembridge数据库及实验室内部化合物库进行虚拟筛选的基础上,内蒙古嘧啶结合生物活性测试,发现了对Chk1具有中等抑制活性的N-取代吡啶-2-氨基嘧啶类衍生物MCL1020。进而根据其结构特征,结合骨架迁越等理性药物设计方法对MCL1020进行了结构优化,设计合成了 62个N-取代吡啶/嘧啶-2-氨基嘧啶类衍生物。Chk1抑制活性测试结果表明:大部分化合物显示出中等到强的Chk1抑制活性。其中,25个化合物的IC50值小于10 nM。4个代表性化合物分别与Gemcitabine联合用药均能显著增强Gemcitabine对SW620细胞株的增殖抑制活性。Western blotting实验结果表明,化合物3-94在0.1和0.5 μM浓度下均能抑制Gemcitabine诱导的Chk1蛋白(S296)的磷酸化。对10个Chk1抑制活性较好的化合物进行了体外5种不同的血液肿瘤细胞株的增殖抑制作用筛选,内蒙古玉嘧磺胺发现该类化合物对人急性髓系白血病MV-4-11细胞株具有较强的增殖抑制作用,与阳性对照AZD7762活性相当,并对其它4种肿瘤细胞株表现出了 一定的选择性。为考察该类化合物的成药性,对4个代表性化合物进行了体外鼠肝微粒体稳定性及MDCK跨膜转运能力测试,结果表明,4个化合物在鼠肝微粒体中稳定,且具有良好的透膜能力。综合体外抑酶及肿瘤细胞增殖抑制活性评价的结果,选取化合物3-209进行了人急性髓系白血病MV-4-11 Ba1b/c裸小鼠皮下移植瘤的生长抑制作用测试。结果显示,该化合物具有显著的抑制白血病肿瘤组织生长的能力,抑瘤率达83.81%,且受试动物体重未见明显下降。对化合物3-94和3-209的初步药代动力学性质评价结果表明,化合物3-209 口服无吸收,但化合物3-94具有一定的口服生物利用度(F=37%),且静脉注射给药后表现出了更好的药代动力学性质,内蒙古氨基嘧啶为进一步体内药效学评价及后续作用机制的研究奠定了基础。